Abstract

DO.05.07

Wirkung von Komplementserum und Zymosan auf retinale Pigmentepithelzellen

Lück K.¹, Wasmuth S.¹, Hennig M.¹, Pauleikhoff D.^2
1Ophtha-Lab der Augenabteilung am St. Franziskus Hospital, Münster; ²Augenabteilung am St. Franziskus Hospital, Münster

Ziel: Eine Genmutation im Komplement Faktor H wird vermehrt bei Patienten mit altersabhängiger Makuladegeneration (AMD) nachgewiesen. Dadurch kann Komplement übermäßig aktiviert werden. Daher wurde in dieser Studie der Einfluss von künstlich aktiviertem Komplementserum auf die Produktion von bei AMD relevanten Zytokinen durch retinale Pigmentepithel (RPE) Zellen untersucht.
Methode: Adhärente RPE Zellen wurden mit verschiedenen Konzentrationen an nativem oder Hitze inaktiviertem Serum kultiviert. Ferner wurden RPE Zellen mit Zymosan, einem Komplement aktivierendem Zellwandbestandteil der Hefe, behandelt. Alternativ wurden Serum und Zymosan kombiniert getestet. Nach 24 Stunden wurden die Zellkulturüberstände abgenommen und im ELISA auf Interleukin (IL)-6, -8 und auf den endothelialen Gefäßwachstumsfaktor (VEGF) überprüft. Zellen in serumfreien Medium dienten zur Kontrolle der Basisproduktion.
Ergebnisse: Unbehandelte RPE Zellen produzierten nur geringe Mengen IL-6, -8 und VEGF. Durch Zugabe von Serum wurden die RPE Zellen vermehrt zur konzentrationsabhängigen Freisetzung der untersuchten Zytokine und Chemokine angeregt. Zymosan verstärkte die Produktion von IL-6 und -8, jedoch nicht die Synthese von VEGF. Natives Serum erhöhte die Ausschüttung von IL-6 und -8 stärker als Hitze inaktiviertes Serum. Die kombinierte Behandlung der RPE Zellen mit Serum und Zymosan resultierte in einer mehr als additiven Steigerung der Ausschüttung von IL-6. Die Ausbeute an IL-8 und VEGF war dagegen rein additiv.
Schlussfolgerungen: IL-8 und VEGF wurden bei Kultivierung mit Serum und Zymosan additiv durch RPE Zellen freigesetzt. Dagegen war die Ausschüttung von IL-6 bei der Aktivierung des im Serum enthaltenen Komplements durch Zymosan weitaus höher. Eine Aktivierung von Komplement könnte daher über proinflammatorisch aktivierte RPE Zellen direkt entzündliche Prozesse bei der AMD fördern.

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