Abstract

DO.05.12

Komplexes Proteinprofil im Kammerwasser beim experimentellen Autoimmun-Glaukomtiermodell (EAG)

Gramlich O. W., Joachim S. C., Reichmann J., Pfeiffer N., Grus F. H.
Experimentelle Ophthalmologie, Universitäts-Augenklinik, Johannes Gutenberg-Universität, Mainz

Ziel: Bisherige Erkenntnisse deuten auf autoimmune Komponenten beim Glaukom hin. In dieser Studie wurde Kammerwasser von Tieren mit experimentellem Autoimmun-Glaukom (EAG) proteochemisch untersucht. Vorversuche zeigten, dass der Verlust von retinalen Ganglienzellen (RGZ) durch Immunisierung mit okulären Antigenen ausgelöst wird.
Methode: Ratten wurden mit Myelin-Basisprotein (MBP) oder Sehnervhomogenat (ONH) plus Freundschem Adjuvans und Pertussis Toxin immunisiert. Die Kontrollgruppe erhielt nur Freund und Pertussis. In Studie I wurden 10 Tiere pro Gruppe 5 Wochen nach Immunisierung getötet. In Studie II wurden 11 Tiere pro Gruppe nach 10 Wochen getötet. Diese erhielten eine Grundimmunisierung (MBP=1 mg, ONH=8 mg) und zwei weitere Immunisierungen mit 50%iger Dosis nach 4 und 8 Wochen. Allen Tieren wurde am Ende der Studien 5 µl Kammerwasser entnommen. Um den möglichen Verlust von RGZs zu ermitteln, wurden in Studie II die Retinae entnommen, fixiert und mit Kresylviolett gefärbt. Die Kammerwasserproben wurden mit C8 Beads (Bruker) fraktioniert und mittels SELDI-TOF-MS (Biorad) analysiert. Die Daten wurden mit multivariaten Statistiken ausgewertet.
Ergebnisse: In Studie I zeigte sich ein signifikanter Unterschied zwischen Proteinprofilen der ONH- und der Kontrollgruppe (p=0,05). Keine Signifikanz war beim Vergleich der Profile der MBP- und der Kontrollgruppe zu sehen (p=0,11). In Studie II zeigte sich ein signifikanter Verlust von RGZs bei der MBP- (p=0,0001) und der ONH-Gruppe (p=0,003). Die Proteinprofile der MBP-Tiere zeigten signifikante Abweichungen zur Kontrollgruppe (p=0,02), die Profile der ONH-Gruppe wiesen keine Unterschiede auf (p=0,27). Drei Signifikante Biomarker (7120, 12297 und 19436 Da) wurden detektiert.
Schlussfolgerungen: Es konnte ein Verlust von RGZ und eine Veränderung der Proteinprofile beobachtet werden. In Abhängigkeit des Antigens beeinflussen sowohl die Versuchsdauer als auch die Anzahl der Immunisierungen das Proteinprofil des Kammerwassers signifikant. Dies deutet auf eine spezifisch-immunologische Pathophysiologie an okulären Strukturen hin.
Gefördert: Boehringer Ingelheim Stiftung, MAIFOR

Copyright: Porstmann Kongresse GmbH. All rights reserved. Impressum, Disclaimer.